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Lipo2000試劑的使用范圍較廣,它不僅可以用于質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染、siRNA表達(dá)載體、雙鏈核糖核酸dsRNA轉(zhuǎn)染,以及RNA等核酸轉(zhuǎn)染,還可以用于文庫篩選的高通量轉(zhuǎn)染。對(duì)于細(xì)胞轉(zhuǎn)染Lipo2000幾乎涵蓋了HEK293、CHO細(xì)胞、HeLa等190多種細(xì)胞系。本期內(nèi)容一起來學(xué)習(xí)下Lipofectamine™2000瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的實(shí)驗(yàn)流程吧!(一)細(xì)胞轉(zhuǎn)染前的準(zhǔn)備:因轉(zhuǎn)染效率依賴于細(xì)胞培養(yǎng)密度,而Lipo2000脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑具有細(xì)胞毒性,使用時(shí)需確保高細(xì)胞密度進(jìn)行,建...
ATCC(AmericanTypeCultureCollection)提供了廣泛的細(xì)胞和菌株供科研和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域使用。為了確保細(xì)胞或菌株的長期保存和穩(wěn)定性,以下是一些常見的方法來保存ATCC細(xì)胞或菌株:凍存保存:凍存是常用的細(xì)胞或菌株保存方法之一。將細(xì)胞或菌株分裝到含有適當(dāng)濃度的保護(hù)劑(例如DMSO或甘油)的凍存液中,然后快速冷凍至低溫(通常為-80°C或液氮中的-196°C)。這種方法可以有效地防止細(xì)胞或菌株的代謝活動(dòng),延長其保存時(shí)間。1.常規(guī)培養(yǎng)保存:某些細(xì)胞或菌株可以通過定...
重組蛋白是利用基因工程技術(shù),將目標(biāo)蛋白的編碼序列克隆到載體中,然后在細(xì)胞中進(jìn)行一系列實(shí)驗(yàn)操作,最終得到具有生物活性的蛋白質(zhì)。重組蛋白在生物學(xué)研究中有很廣泛的應(yīng)用,比如制備抗體、進(jìn)行ELISA實(shí)驗(yàn)、藥物研究、免疫實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞培養(yǎng)以及晶體結(jié)構(gòu)分析等。對(duì)于生物學(xué)研究來說,重組蛋白的純化是非常重要的一步。純化重組蛋白的方法有很多種,下面介紹幾種常用的方法:親和層析法:利用目標(biāo)蛋白與親和柱上的配體之間的特異性結(jié)合來分離目標(biāo)蛋白。通過調(diào)節(jié)條件,使目標(biāo)蛋白與親和柱上的配體結(jié)合,而其他雜質(zhì)則從...
在生物醫(yī)學(xué)研究中,轉(zhuǎn)染技術(shù)是一種常用的實(shí)驗(yàn)方法,用于將外源性基因?qū)爰?xì)胞中,以研究基因功能、表達(dá)調(diào)控等重要問題。而在這些實(shí)驗(yàn)中,轉(zhuǎn)染試劑的選擇和使用是關(guān)鍵環(huán)節(jié)。其中,PEI(聚乙烯亞胺)線性轉(zhuǎn)染試劑以其高效、安全、易操作等優(yōu)點(diǎn),得到了廣泛的應(yīng)用。PEI是一種高分子聚合物,具有優(yōu)異的細(xì)胞穿透性和基因轉(zhuǎn)染能力。其工作原理主要是通過與DNA或RNA形成復(fù)合物,保護(hù)它們免受細(xì)胞內(nèi)酶的降解,同時(shí)幫助其進(jìn)入細(xì)胞。PEI線性轉(zhuǎn)染試劑與其他轉(zhuǎn)染試劑相比,具有更高的轉(zhuǎn)染效率和更低的細(xì)胞毒性,因...
在生物醫(yī)學(xué)研究中,轉(zhuǎn)染是一種重要的技術(shù),用于將外源基因?qū)爰?xì)胞內(nèi)。而線性轉(zhuǎn)染試劑,以其高效、安全、易操作等優(yōu)點(diǎn),逐漸成為了轉(zhuǎn)染研究中的熱門選擇。本文將重點(diǎn)介紹一種名為PEI(聚乙烯亞胺)的線性轉(zhuǎn)染試劑,探討其適用性及廣泛應(yīng)用。PEI是一種具有多個(gè)正電荷的聚合物,能與DNA形成絡(luò)合物,從而保護(hù)DNA免受細(xì)胞內(nèi)核酸酶的降解。此外,PEI還能通過形成納米顆粒,將DNA包裹在其中,增加其跨膜能力,從而提高轉(zhuǎn)染效率。這種轉(zhuǎn)染方法具有較高的細(xì)胞適用性,能適用于各種類型的細(xì)胞,包括原代細(xì)胞...
在基因轉(zhuǎn)染研究中,轉(zhuǎn)染試劑的作用非常重要。脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑和非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑是兩種常用的轉(zhuǎn)染方法,它們?cè)诮Y(jié)構(gòu)、原理和應(yīng)用方面有一些區(qū)別。下面將從不同的角度來比較這兩種轉(zhuǎn)染試劑,以便更好地理解它們之間的差異。結(jié)構(gòu)和組成--脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑的主要成分是由磷脂和膽固醇等構(gòu)成的雙層脂質(zhì)結(jié)構(gòu)。這種結(jié)構(gòu)使得脂質(zhì)體能夠在水相和脂相之間形成穩(wěn)定的界面,并包裹外源基因或RNA分子。--非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑的結(jié)構(gòu)則多種多樣,可以是聚合物、蛋白質(zhì)或糖類等。這些轉(zhuǎn)染試劑不包含脂質(zhì)結(jié)構(gòu),而是通過其他機(jī)制實(shí)現(xiàn)基...
脂質(zhì)體和非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑是常用的基因遞送技術(shù),它們能把DNA、siRNA、mRNA等分子送到真核細(xì)胞中,用于各種研究和藥物開發(fā)。今天我們來談?wù)勚|(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑的配方。脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑主要由脂質(zhì)體、DNA、緩沖液和穩(wěn)定劑組成。脂質(zhì)體是一種包裹DNA的物質(zhì),能把它送進(jìn)細(xì)胞。它的配方包括正電荷脂質(zhì)、中性脂質(zhì)、膽固醇和PEG。緩沖液負(fù)責(zé)調(diào)整pH值和離子強(qiáng)度,有助于提高轉(zhuǎn)染效率。穩(wěn)定劑則保護(hù)所有這些東西,防止在制備過程中降解。常見的一種脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑配方如下:*1,2-二棕櫚酸-3-辛?;?..
轉(zhuǎn)染試劑在基因轉(zhuǎn)染研究中起著重要作用。常用的轉(zhuǎn)染方法包括脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑和非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑,它們都有各自的優(yōu)勢(shì)和特點(diǎn)。那脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑和非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑哪個(gè)轉(zhuǎn)染效率更高?下面我們從轉(zhuǎn)染效率的角度來比較這兩種轉(zhuǎn)染試劑,以更好地理解它們的適用范圍和優(yōu)缺點(diǎn)。脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑通過脂質(zhì)體與細(xì)胞膜相互作用來實(shí)現(xiàn)基因或RNA導(dǎo)入。脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑可以有效地包裹外源基因或RNA分子,并促進(jìn)其進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)。脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑通常具有較高的轉(zhuǎn)染效率,特別適用于貼壁細(xì)胞或原代培養(yǎng)細(xì)胞。非脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染試劑是指不含...